植物Elisa試劑盒的檢測模式和通用規(guī)則說明

更新時間：2022-03-25

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　　植物Elisa試劑盒的特異性好，大大降低了檢測的假陽性，靈敏度高，采用靈敏的熒光檢測系統(tǒng)對熒光信號進行實時監(jiān)控，操作簡單，無PCR產(chǎn)物污染。省去了麻煩的基因序列查詢、引物探針設(shè)計、PCR擴增條件優(yōu)化等大量費時、費力、費錢的繁瑣工作。

　　植物Elisa試劑盒的兩種檢測模式：

　　交探針模式(Beacon)：分子信標是一種呈發(fā)夾結(jié)構(gòu)的莖環(huán)寡核苷酸探針，兩端的核酸序列互補配對，因此標記在一端的熒光基團與標記在另一端的淬滅基團緊緊靠近。熒光基團被激發(fā)后產(chǎn)生的光子被淬滅劑淬滅，由熒光基團產(chǎn)生的能量以紅外而不是可見光形式釋放出來。分子信標的莖環(huán)結(jié)構(gòu)中，環(huán)一般為15-30個核苷酸長，并與目標序列互補；莖一般5-7個核苷酸長，并相互配對形成莖的結(jié)構(gòu)。熒光基團標記在探針的一端，而淬滅劑則標記在另一端。在復性溫度下，因為模板不存在時形成莖環(huán)結(jié)構(gòu)，當加熱變性會互補配對的莖環(huán)雙鏈解開，如果有模板存在環(huán)序列將與模板配對。與模板配對后，分子信標將成鏈狀而非發(fā)夾狀，使得熒光基團與淬滅劑分開。當熒光基團被激發(fā)時，因淬滅作用被解除，發(fā)出激發(fā)光子。由于是酶切作用的存在，分子信標也是積累熒光。

　　植物Elisa試劑盒的通用規(guī)則：

　　1、要保證移液槍的準確性，過失不能超過2%。可用水和電子天平進行確認。但有專業(yè)人員進行糾正。

　　2、要配備20ul、50ul、00ul、000ul和排槍各一支。羅致不同的液體后，要更換槍頭。即使是羅致標準品時。

　　3、要在實驗前小時將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都康復到室溫，以使成果更安穩(wěn)。

　　4、實驗時，要使底物避光保存。

　　5、用槍羅致液體時速度不能太快，避免產(chǎn)生氣泡而使羅致量不準確。

　　6、羅致液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少過失。

　　7、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內(nèi)液體觸摸，可使槍頭上的液滴和孔壁觸摸，液滴會天然流下去。

　　8、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行悄悄晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功用。

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